GB/T 38477-2020.Determination of gene expression-Western blot.
1范圍
GB/T 38477規(guī)定了用蛋白印跡( Western blot)法測定基因表達的方法原理、試劑或材料、儀器設備、測定步驟和結果分析。
GB/T 38477適用于動植物組織或體外培養(yǎng)細胞目的基因表達測定。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。
GB/T 6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法
3術語、定義和縮略語
3.1 術語和定義
下列術語和定義適用于本文件。
3.1.1
基因表達 gene expression
將儲存在DNA分子中的遺傳信息經過轉錄和翻譯,轉變成具有生物活性的蛋白質分子的過程。
3.2縮略語
下列縮略語適用于本文件。
BSA:牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin)
ECL:增強型化學發(fā)光( Enhanced Chemiluminescence)
SDS:十二烷基硫酸鈉( Sodium Dodecyl Sulfate)
SDS-PAGE:十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis)
TBS: Tris緩沖鹽溶液( Tris Buffered Saline)
TBST :吐溫-20/ Tris緩沖鹽溶液(Tween-20/ Tris Buffered Saline)
4.原理
SDS-PAGE分離的蛋白質轉移到轉印膜上后，先用抗目的蛋白質的一抗與轉印膜上的蛋白質反應,然后利用帶標記的二抗與一抗反應,最后根據(jù)二抗標記物的特性,檢測微量蛋白質。

檢測流程

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